摘要：在食品安全檢測(cè)方法中，氣相色譜 技術(shù)是十分重要的檢測(cè)技術(shù)之一。它具有操 作快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確及分離效果好等優(yōu)點(diǎn)， 因此本文為反式脂肪酸的研究提供了一種切 實(shí)可行的分析方法。

　　關(guān)鍵詞：食品檢測(cè)；氣相色譜技術(shù)；反式脂肪酸
　　、材料與方法 1.1儀器與試劑
　　氣相色譜儀，C-R7Ae數(shù)據(jù)處理機(jī)，OPGU-1500S氫氣發(fā)生器。脂肪酸甲脂標(biāo)準(zhǔn)品：Sigma公司產(chǎn)品，共18種；其中 飽和脂肪酸甲酯有C10:0,C12: 0, C14:0, C16:0, C17:0, C18:0, C20:0, C22:0和 C24: 0共9種;不飽和脂肪酸甲酯有C16: 1n-9 (trans), C16:1n-9 (cis), C18：1n- 6(cis),C18:1n-9(cis),C18:1n-11(cis), C18:1n-9 (trans), C18:1n-11 (trans), C18: 2n-9, 12(cis)和C18 : 2n-9, 12 (trans)共 9種。以正己烷為溶劑，制成約0. 4mg/ml的標(biāo) 準(zhǔn)液。試劑：正己烷、氫氧化鈉、氯化鈉、甲 醇、3氟化硼，均為分析純。樣品選用黃油、 全脂奶粉和人造奶油。 1.2色譜條件
　　選用CP-Sil88FAME毛細(xì)管石英柱（100mX 0.25irnX0.20Wm),FID檢測(cè)器,載氣為高純氮 氣，壓力為300Wa,氫氣壓力50kPa,空氣壓力 50Wa);進(jìn)樣口溫度250。C,檢測(cè)器溫度260。C; 柱溫采用三級(jí)程序升溫：初始溫度110。C,保持 4min;以3°C/min升溫至170°C;再以2°C/min升 溫至200。C;zui后再以3。C/min升溫至230。C,保 持6min。分流比為1:40。 1.3樣品甲酯化
　　一般食品按照GB/T5009. 6食品中脂肪的 測(cè)定方法進(jìn)行脂肪提取。乳及乳制品則按照 方法GB/T5009.46提脂。取適量提取的脂肪或 油脂樣品直接按照GB/T17376-1998中的方法 制備動(dòng)植物油脂的脂肪酸甲酯，即先用適量氫 氧化鈉甲醇溶液回流后加入12%?15%的3氟 化硼甲醇溶液，再回流，加入正己烷和飽和氯 化鈉溶液，振蕩萃取后取正己烷層于氣相色譜 上分析。
　　、結(jié)果

　　順、反式脂肪酸的分離情況 由圖1脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖可見(jiàn)，大 部分飽和脂肪酸之間、飽和脂肪酸與不飽和 脂肪酸之間、不飽和脂肪酸中的順式與反式 之間都分離得很好，只有脂肪酸甲酯C18:1n- 6(cis)、C18:1n-9(cis)和C18:1n-11(cis) 之間、以及脂肪酸甲酯C18:1n-9(trans)和 C18:1n-11(trans)之間分離不夠理想，*滿(mǎn) 足檢測(cè)要求。
　　線性范圍和檢出限
　　選用脂肪酸C16:0甲酯和脂肪酸C18:0甲 酯標(biāo)準(zhǔn)品，配制成濃度0.050?1.500mg/m的混 合標(biāo)準(zhǔn)液。脂肪酸C16:0甲酯的線性回歸方程 Y=565413X+1124(r=0.997,n=5);脂肪酸C18:0 甲酯的線性回歸方程Y=577448X+1371 (r=0. 9 98, n=5)；以基線噪聲的2倍所對(duì)應(yīng)的濃度為 方法的檢出限，脂肪酸C16:0甲酯的檢出限為 8.1wg/ml、脂肪酸C18:0甲酯為8.9wg/m,l *可以滿(mǎn)足檢測(cè)要求。 2.3加標(biāo)回收試驗(yàn)
　　取同一人造奶油樣品提取的脂肪2份，分 別選擇2個(gè)水平，加入脂肪C18:1n-9(cis)甲 酯標(biāo)準(zhǔn)品和脂肪酸C18:1n-9(trans)甲酯標(biāo)準(zhǔn) 品，毎個(gè)水平檢測(cè)兩次,檢測(cè)結(jié)果取均值，回收 率為98.33%?100.6%。見(jiàn)表1。 2.4反式油酸含量的檢測(cè) 通過(guò)檢測(cè)，黃油和人造奶油檢測(cè)到了反式 脂肪酸，以外標(biāo)法進(jìn)行定量分析，4種樣品的 分析結(jié)果見(jiàn)表2。 表2 4種.

　　反式脂肪酸的來(lái)源 3.1.1反芻動(dòng)物脂肪及其乳脂 反芻動(dòng)物（如牛、羊、馬等）的脂肪組織 和乳及乳制品，反芻動(dòng)物體內(nèi)脂經(jīng)其體內(nèi)微生 物部分氫化作用而產(chǎn)生少量反式不飽和脂肪 酸，反芻動(dòng)物體脂中TFAs的含量占總脂肪酸 的4%11%,牛奶、羊奶中的含量占總脂肪的 33%?5%。
　　氫化加工的植物油脂 天然油脂如：大豆油、菜籽油，它們脂肪 酸的存在形式是順式結(jié)構(gòu),而在油脂的氫化過(guò) 程，油脂中不飽和的雙鍵轉(zhuǎn)變?yōu)閱捂I的同時(shí)， 則產(chǎn)生了部分異構(gòu)化的反式脂肪酸。人造黃 油、人造奶油、起酥油等均屬于氫化油脂，它 們中反式脂肪酸含量一般在5%?45%之間，zui 高可達(dá)65%。當(dāng)它們作為原料被添加到食品中 時(shí),會(huì)使得食品中含有反式脂肪酸。 3.2各種脂肪酸的分離情況 雖然脂肪酸C18:1n-9 (trans)和C18 ： 1n- 9(trans)兩者之間及脂肪酸C18:1n-6(cis)、
　　和C18:1n-11(cis)三者之間分 離不很*,但反式脂肪酸C18:1(trans)與順 式脂肪酸C18:1(cis)之間分離尚好，可以滿(mǎn)足 反式脂肪酸的檢測(cè)要求。
　　脂肪酸C10:0至C24 ： 0, 8種偶數(shù)碳飽和脂 肪酸，由低碳數(shù)先、高碳數(shù)后極有規(guī)律地有序 出峰。某一同碳數(shù)的飽和脂肪酸的色譜峰位 于不飽和脂肪酸之前，如脂肪酸C16:0位于脂 肪酸C16:1之前；同碳數(shù)的不飽和脂肪酸,烯鍵 少先出峰,如脂肪酸C18: 1位于脂肪酸C18: 2 之前；順式、反式脂肪酸的色譜峰相鄰，反式 位于順式之前，如脂肪酸C16:1n-9(trans) 位于脂肪酸C16:1n-9(cis)之前、脂肪酸 C18:1n-9 (trans)位于脂肪酸C18 ： 1n-9 (cis) 之前；同一異構(gòu)體的不飽和脂肪酸，烯鍵位于 碳原子序數(shù)大的色譜峰居于序數(shù)小的之前。 3.3毛細(xì)管色譜柱的選擇 有實(shí)驗(yàn)表明，色譜柱長(zhǎng)短明顯影響各種脂 肪酸的分離效果。選用50m長(zhǎng)色譜柱，可以達(dá) 到各種飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸良好的分 離效果。若要*分離檢測(cè)順、反式脂肪酸， 應(yīng)采用100m長(zhǎng)色譜柱。當(dāng)然也不是柱越長(zhǎng)越 好。
　　柱溫對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響 不同的柱溫條件，會(huì)對(duì)反式脂肪酸的色 譜峰分離產(chǎn)生影響。按Subrama-niam等選 用的柱溫一級(jí)程序升溫方法，脂肪酸C16:0與 C20:0之間的出峰時(shí)間間距太近，這兩種脂肪 酸之間的脂肪酸C16:1n-9(cis)、C16:1n- 9 (trans)、C18:0、C18: 1n-6(cis)、 C18:1n-9(cis)、 C18:1n-11(cis)、 C18:1n- 6(trans)、 C18:1n-9 (trans)、 C18:1n- 9 (trans)、C18:2n-9. 12(cis)和C18:2n- 9.12(trans)等11種脂肪酸過(guò)于擁擠、分離效 果不好。
　　采用3級(jí)程序升溫方法，目的是在第二級(jí) 程序升溫中降低色譜柱的升溫速度，擴(kuò)大脂肪 酸C16:0與脂肪酸C20:0之間的出峰時(shí)間間距， 使得11種脂肪酸達(dá)到更好的分離。